銘修實驗室-  2015版中國藥典微生物檢查培養(yǎng)基調整變更

一、 無菌檢查 與2010版藥典相比，2015版藥典中將改良馬丁培養(yǎng)基、營養(yǎng)肉湯和營養(yǎng)瓊脂，修訂為胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基、胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基；方法驗證試驗修訂為方法適用性試驗；培養(yǎng)基的靈敏度和方法適用性試驗也進行了修訂。具體可參考中國藥典2015 版附錄征求意見稿—1101 無菌檢查法 二、微生物限度檢查：控制菌檢查法 與2010版中國藥典相比，在2015版藥典中供試品制備方面增加了pH7.2 磷酸鹽緩沖液和胰酪大豆胨肉湯。菌液制備方面胰酪大豆胨肉湯、胰酪大豆胨瓊脂替代營養(yǎng)肉湯、營養(yǎng)瓊脂；沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基替代改良馬丁培養(yǎng)基、改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基；梭菌增菌培養(yǎng)基替代硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基進行生孢梭菌菌液的制備。微生物計數(shù)環(huán)節(jié)，增加需氧菌的MPN 法計數(shù) ；使用胰酪胨大豆瓊脂替代營養(yǎng)瓊脂進行需氧菌計數(shù)；使用沙氏葡萄糖瓊脂替代玫瑰紅鈉瓊脂進行霉菌和酵母菌總數(shù)測定，同時增加玫瑰紅鈉瓊脂、沙氏葡萄糖瓊脂(含抗生素)兩種選擇性培養(yǎng)基于對因沙氏葡萄糖瓊脂上生長的細菌使霉菌和酵母菌的計數(shù)結果不符合微生物限度要求情況下的霉菌和酵母菌計數(shù)；取消酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(YPD)的酵母菌計數(shù)。耐鹽革蘭氏陰性菌的檢驗耐鹽革蘭氏陰性菌的檢驗使用腸道菌增菌液體培養(yǎng)基和紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。大腸埃希菌(Escherichia coli)檢驗2015版藥典中大腸埃希菌的選擇和分離培養(yǎng)使用麥康凱液體培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基，較2010版流程有所簡化，并取消了對大腸菌群的檢驗。沙門菌（Salmonell）檢驗2015版藥典中沙門氏菌的選擇和分離培養(yǎng)使用RV 沙門菌增菌液體培養(yǎng)基，木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基，進一步鑒定使用三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基。銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）檢驗銅綠假單胞菌的選擇和分離培養(yǎng)使用溴化十六烷基*銨瓊脂培養(yǎng)基，結合氧化酶試驗進行判別，并取消了綠膿菌素的直接試驗。金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）檢驗金黃色葡萄球菌的選擇和分離培養(yǎng)使用甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基。取消了金黃色葡萄球菌的選擇性增菌。梭菌（Clostridia）檢驗梭菌選擇和分離培養(yǎng)使用哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基，結合過氧化氫酶試驗進行判別。白色念珠菌（Candida albicans）白色念珠菌的選擇和分離培養(yǎng)使用沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基和念珠菌顯色培養(yǎng)基，并取消了牙管試驗。具體可參考中國藥典2015 版附錄征求意見稿—1106 非無菌產品微生物限度檢查：控制菌檢查法 中國藥典2015 版附錄征求意見稿—1105 非無菌產品微生物限度檢查：微生物計數(shù)法 三、抑菌效力檢查法 抑菌效力檢查部分參照歐洲藥典對抑菌效力檢查結果判斷標準進行了修訂，具體可參考： 中國藥典2015 版附錄征求意見稿—1121 抑菌效力檢查法 四、制藥用水檢驗 制藥用水分為飲用水、純化水、注射用水和滅菌注射用水，2015版藥典中使用R2A瓊脂培養(yǎng)基進行制藥用水的檢驗，接軌歐美藥典標準。