管裝培養(yǎng)基使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時，應(yīng)嚴(yán)格按照廠商提供的使用說明配置。記錄所有相關(guān)數(shù)據(jù)，如質(zhì)量/體積、pH、制備日期、滅菌條件和制備人員等。

 

    管裝培養(yǎng)基使用各別成分制備培養(yǎng)基時，應(yīng)按照配方準(zhǔn)確配制，記錄所有細(xì)節(jié)信息，如；培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質(zhì)含量、制造商、批號、pH、培養(yǎng)基體積（分裝體積）、無菌措施（包括實(shí)施的方式、溫度及時間）、配置日期、人員等，以便潮源。

 

    1.水

 

    除特定要求，實(shí)驗(yàn)室用水的電導(dǎo)率在25℃下應(yīng)不高于25uS/cm（相當(dāng)于電阻率≥0.4MΩcm）。

 

    微生物污染應(yīng)不超過103CFU/mL，低于102CFU/mL。應(yīng)根GB/T 5750.12或其他有效方法，定期檢驗(yàn)微生物的污染。

 

    2.稱量和復(fù)水

 

    管裝培養(yǎng)基稱量所需量的脫水培養(yǎng)基（注意防止吸入粉末，尤其是含有有害物質(zhì)的培養(yǎng)基粉末），先加入少量水，充分混合（注意避免培養(yǎng)基結(jié)塊）后再加水至所需的量。

 

    3.溶解和分裝

 

    脫水培養(yǎng)基加水后適當(dāng)加熱，并不攪拌使其快速溶解，必要時，重新溶解。含瓊脂的培養(yǎng)基在加熱溶解前應(yīng)浸泡幾分鐘。

 

    4.pH的測定和調(diào)整

 

    用pH計(jì)測定pH,必要時在滅菌前調(diào)節(jié)pH，除特殊說明外，培養(yǎng)基滅菌后冷卻至25℃時，要求pH的變化不超過0.2pH單位。通常使用濃度約為40g/L（ 約1 mol/ L）的氫氧化鈉溶液或濃度約為36.5g/L（約1mol/L）的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH。如果滅菌后調(diào)節(jié)pH，溶液需滅菌。

 

    注：商品化培養(yǎng)基在高壓滅菌前后pH可能發(fā)生明顯變化，但使用蒸餾水或去離子水時，滅菌前無需調(diào)節(jié)pH。

 

    5.分裝

 

    將配置好的培養(yǎng)基分裝到適當(dāng)?shù)娜萜髦校萜鞯捏w積至少為體積的1.2倍。

 

    6.滅菌

 

    ①概述

 

    管裝培養(yǎng)基和試劑的滅菌通常采用濕熱滅菌或過濾滅菌。

 

    有些培養(yǎng)基無需高壓滅菌，可煮滅菌。如，含亮綠的腸道菌培養(yǎng)基對光和熱特別敏感，應(yīng)在煮沸后快速冷卻，避光保存。同樣，一些試劑則不需要滅菌，直接使用（參見相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或生產(chǎn)廠商的使用說明）。

 

    ②濕熱滅菌

 

    濕熱滅菌在高壓鍋或培養(yǎng)基制備器中進(jìn)行。高壓霉菌一般采用121℃±3℃霉菌15min。如果培養(yǎng)基的體積超過1000mL，要對滅菌條件進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。所有操作均要按照標(biāo)準(zhǔn)和使用說明的規(guī)定進(jìn)行。

 

    注：大容量培養(yǎng)基（＞1000mL）滅菌時可能會造成過度加熱。

 

    加熱后應(yīng)采取適當(dāng)?shù)姆绞嚼鋮s，防止沸溢。這對大容量培養(yǎng)基和敏感性培養(yǎng)基（如含亮綠的培養(yǎng)基）是非常重要的。

 

    ③過濾滅菌

 

    過濾滅菌可以在真空負(fù)壓或正壓條件下進(jìn)行。使用無菌設(shè)備和0.2um孔徑的濾膜。將過濾裝置的各個部分消毒滅菌，或使用預(yù)消毒設(shè)備。

 

    一些濾膜上附著蛋白質(zhì)或其他物質(zhì)。為達(dá)到有效過濾，應(yīng)事先將濾膜用無菌水潤濕。

 

    ④監(jiān)測

 

    應(yīng)對經(jīng)濕熱或過濾滅菌的培養(yǎng)基進(jìn)行監(jiān)測，尤其要對pH、色澤、滅菌效果和均勻度等指標(biāo)進(jìn)行監(jiān)測。

 

    7.添加劑的制備

 

    制備含有有毒物質(zhì)（特別是抗生素）時應(yīng)小心操作，避免因粉末的擴(kuò)散造成實(shí)驗(yàn)人員過敏或發(fā)生其他不良反應(yīng)。采用適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施并小心按照產(chǎn)品使用說明操作。不要使用過期的試劑；抗生素工作溶液現(xiàn)配現(xiàn)用；批量配置的抗生素溶液分裝后向冷凍保存，但解凍后的貯存溶液不可再次冷凍；廠商應(yīng)提供冷凍對抗生素活性影響的相關(guān)資料，也可由使用者自行測定。