銘修(上海)生物實驗室細胞培養(yǎng)中常用培養(yǎng)基及基本特性
RPMI-1640廣泛應(yīng)用于哺乳動物、特殊造血細胞、正?;驉盒栽錾陌准毎s交瘤細胞的培養(yǎng),是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。
2、Minimum Essential Medium(MEM)
也稱zui低必需培養(yǎng)基,它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單,可廣泛適應(yīng)各種已建成細胞系和不同地方的哺乳動物細胞類型的培養(yǎng)。MEM-Alpha一般用于培養(yǎng)一些難培養(yǎng)細胞類型,而其它沒有特殊之處的細胞株則幾乎均可采用MEM來培養(yǎng)。
3、DMEM-高糖(標準型)是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基,可用于許多哺乳動物細胞培養(yǎng),更適合高密度懸浮細胞培養(yǎng)。適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養(yǎng),也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細胞的培養(yǎng)。
4、DMEM-低糖(標準型)是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基,可用于許多哺乳動物細胞培養(yǎng)。低糖適于依賴性貼壁細胞培養(yǎng),特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養(yǎng)。
5、DMEM/F12
DMEM/F12培養(yǎng)基適于克隆密度的培養(yǎng)。F12培養(yǎng)基成分復(fù)雜,含有多種微量元素,和DMEM以1:1結(jié)合,稱為DMEM/F12培養(yǎng)基(DME/F12medium),作為開發(fā)無血清配方的基礎(chǔ),以利用F12含有較豐富的成分和DMEM含有較高濃度的營養(yǎng)成分為優(yōu)點。該培養(yǎng)基適用于血清含量較低條件下哺乳動物細胞培養(yǎng)。為了增強該培養(yǎng)基的緩沖能力,改良之一是在DMEM/F12(1:1)中加入15mMHEPES緩沖液。
6、McCoy’s
McCoy’s Medium 主要為肉瘤細胞的培養(yǎng)所設(shè)計,可支持多種(如骨髓、皮膚、肺和脾臟等)的原代移植物的生長,除適于一般的原代細胞培養(yǎng)外,主要用于作組織活檢培養(yǎng)、一些淋巴細胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細胞的生長支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細胞、人淋巴細胞、HT-29、BHL-100等上皮細胞。
7、Iscove’s Modified Dulbecco Medium (IMDM)
Guilber 和Iscove將Dulbecco’Medium 改良為 Iscove’s Medium,用于培養(yǎng)紅細胞和巨噬細胞前體。此種培養(yǎng)液含有硒、額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉和HEPES。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進小鼠B淋巴細胞,LPS刺激的B細胞,骨髓造血細胞,T細胞和淋巴瘤細胞的生長。IMDM為營養(yǎng)非常豐富的培養(yǎng)液,因此可以用于高密度細胞的快速增殖培養(yǎng)。
8、M-199 Medium
1950年,Morgan成功研制出具有確定化學(xué)成分的細胞培養(yǎng)液,即M-199,主要用于雞胚成纖維細胞培養(yǎng)。此培養(yǎng)液必須輔以血清才能支持長期培養(yǎng)。M-199可用于培養(yǎng)多種種屬來源的細胞,并能培養(yǎng)轉(zhuǎn)染的細胞。
9、Leibovitz Medium (L-15)
L-15培養(yǎng)液適用于快速增殖瘤細胞的培養(yǎng),用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細胞株。此培養(yǎng)液采用磷酸鹽緩沖體系,氨基酸組成進一步改良,并由半乳糖替代了葡萄糖。
10、Ham’s F-10培養(yǎng)基:適應(yīng)小鼠細胞、人類二倍體的培養(yǎng)。
11、Ham’s F-12培養(yǎng)基:可以在加入很少血清的情況下應(yīng)用,特別適合單細胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng),是無血清培養(yǎng)中常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)液。
12、William’s Medium E:用于大鼠肝上皮細胞的長期細胞培養(yǎng)。
13、MCDB 131 培養(yǎng)液:用于培養(yǎng)內(nèi)皮細胞。
14、Opti-MEM I Reduced Serum Media:用于培養(yǎng)造血細胞。
15、植物血凝素(PHA):增加細胞轉(zhuǎn)化和DNA合成。
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